冻存时的操作步骤和注意细节。

操作步骤：

1.用移液器吸走原培养基，加入适量PBS洗1-2遍；

2.加入适量胰酶，置于培养箱中消化；

3.待消化到位后加入适量血清或培养基终止消化，800-1000rpm离心3-5min；

4.配制冻存液，待细胞离心后去上清，加入冻存液重悬，转移到冻存管中；

5.将冻存管放入程序降温盒中，-80度过夜，然后转移到液氮中保存。