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PI染色液使用说明
货号:FXC0670
规格:50ml
PI染色液产品简介
碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)即2,7-二氨基-9-苯基10-二乙胺基丙基碘化菲啶,是一种核酸荧光染料,它不能透过完整的细胞膜,但能够透过死细胞和凋亡中晚期细胞的细胞膜而使细胞核红染。因此,作为荧光探针常用于细胞凋亡(apoptosis)或细胞坏死(necrosis)的检测。在流式细胞和激光共聚焦分析中,常用于凋亡早晚期的细胞以及死细胞的区分以及在免疫染色时用于死细胞的非特异性染色的减除。由于PI可以定量插入DNA中,因此,还可用于细胞周期的分析与测定研究。
PI-DNA复合物的激发和发射波长分别为535 nm和615 nm。
本染色液将浓缩的染液与稀释液分开放置,一方便为了染液的稳定性,另一方便为了快速解冻(稀释液放2-8℃)
试剂组成 | 规格 | 保存条件 |
PI浓缩液(50X) | 1ml | -20℃避光 |
PI稀释液50ml | 50ml | 2-8℃ |
本染色液整体有效期一年,稀释液长久不用可放-20度。
PI染色液使用说明:
染色液的配制:将PI浓缩液取出解冻,轻轻混匀,短时间离心,根据使用量,按照1ml PI稀释液加入20ul PI浓缩液的比例配制,即成。此配好的染色液浓度度为10ug/ml,如果感觉染色颜色比较深,可适当的稀释(用稀释液)。此配好的染色液未用完可存放于-20℃避光。
a.对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行PI染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的PI染色。
b. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
c. 吸除,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
d.直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
注意事项:
1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 此染色液可一次性配完使用,保存于-20℃。但相对来说,50ml液体解冻速度不如1ml的解冻快,而且染料在高浓度时更稳定。
3. 本产品配送的滴瓶一滴约为50ul。装入染色液后请套入黑色封口袋。
4. 染色时间可根据染色结果来适当调整。