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SDS-PAGE凝胶配制试剂盒现货供应
名称 | 规格 | 保存条件 |
30%丙烯酰胺(29:1) | 100ml | 2-8度 |
1.5mol/LTris(pH8.8) | 100ml | 2-8度 |
1.0mol/LTris(pH6.8) | 15ml | 2-8度 |
过硫酸铵干粉 | 0.5g | RT |
10%SDS | 5ml | RT |
TEMED | 0.5ml | RT |
产品简介
我们生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制PAGE胶(即聚丙烯酰胺凝胶)。
SDS-PAGE凝胶配制试剂盒可用于配制SDS-PAGE凝胶。
本试剂盒约可配制25-50块常规大小的PAGE胶。
使用说明:
一,取5支1.5ml离心管,将过硫酸铵干粉分装成100mg/支,标记好备用。
二,凝胶制备:
1, 取一支称好的100mg过硫酸铵干粉,加入1ml蒸馏水,混匀,此配好的10%过硫酸铵溶液2-8度可保存一周。洗干净电泳玻璃板,夹好。
2, 根据目标蛋白分子量大小,选取凝胶浓度,按下表配制。先配分离胶,再配浓缩胶。(可根据用量自行等比加减)
| 分离胶15% | 分离胶12% | 分离胶10% | 分离胶8% | 浓缩胶(5%) |
总体积 | 10ml | 10ml | 10ml | 10ml | 5ml |
30%丙烯酰胺(29:1) | 5ml | 4ml | 3.3ml | 2.7ml | 0.83ml |
1M Tris-HCL (PH6.8) | 0 | 0 | 0 | 0 | 0.625ml |
1.5M Tris-HCL(PH8.8) | 2.5ml | 2.5ml | 2.5ml | 2.5ml | 0 |
10%SDS | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 50ul |
ddH2O | 2.3ml | 3.3ml | 4.0ml | 4.6ml | 3.42ml |
10%过硫酸铵 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 75ul |
TEMED | 10ul | 10ul | 10ul | 10ul | 7.5ul |
注意:
1,TEMED和10%过硫酸铵zui后加,在加入前需混匀前面所加试剂。10%过硫酸铵在4℃有效期为一周(-20℃三个月),TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。在常温下胶30分钟内可以凝固,如温度过低,可放37℃温箱凝固。灌完分离胶后,轻轻的加1ml ddH2O封上层,胶凝固后可见到分界线。灌浓缩胶前,先倾去水层,再用吸纸吸干。浓缩胶灌好后立刻插入梳子。浓缩胶凝固后,放入电泳液中(让电泳液漫过加样孔),轻轻的拨出梳子,可防加样孔变形。
2,配制量可按上表等比加减。如果所用胶浓度与上面不同,可自行调整,主要是调整30%丙烯酰胺的量(需要浓度×总体积/30%),zui后用水补足总体积。
六,上样,电泳,一般是浓缩胶80V,分离胶120V恒压,等溴酚兰电泳到合适的位置,结束电泳,染色或者进行下一步实验。