DNA产物纯化试剂盒

DNA纯化试剂盒

原理简介
本试剂盒利用*的缓冲液，可从PCR产物，连接产物，酶切产物等溶液中回收较大DNA片段，同时除去其它蛋白、无机盐及寡核苷酸引物等杂质。
对于50ul的含DNA样品，本试剂盒（以100T为例）可用100次。对于更小体积的样品，本试剂盒使用次数更多。如果一次纯化1ml样品，本试剂盒（以100T为例）可用5次。

DNA产物纯化试剂盒注意事项
1、回收<200bp DNA片段时，应加大结合液的体积（如8倍体积或者更高）。
2、玻璃奶的多少决定吸附能力的大小，对于核酸含量低的样品，可适当减少加入量，同时减少加入洗脱液的量（TE缓冲液）。
3、如非指明，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
操作步骤
1．将含有DAN的样品离心，取上清转移到一新的离心管中（如无沉淀，可省去此步）。
2．向溶液中加入5倍体积结合液（如为小片段，可加入8倍体积或者更高体积）混匀。正常情况应该为淡黄色，如溶液变红，请加入不超过1/10体积的3M 乙酸钠 PH5.2。
3．玻璃奶混匀。取50ul混匀的玻璃奶加入上面溶解的溶胶液中，混匀（如DNA含量过低，可减少玻璃奶加入量，如只加入20ul）。
4．室温放置2-3分钟。期间可翻转混匀1-2次。
5．10000转/分钟离心1分钟，去上清；沉淀加入1ml 70%乙醇，振荡混匀，10000转/分钟离心1分钟，去上清，70%乙醇重复洗一次，再用无水乙醇洗一次。去上清，再次离心2分钟，用小吸头吸去上清（70%乙醇洗两次，无水乙醇洗一次）。
6．室温放置10分钟，加入50ul左右TE缓冲液混匀溶解，50-55℃水浴5分钟。离心，取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
7．电泳或者其他方法检测，进入下游实验。