ECL化学发光底物 BL520A 现货

ECL 化学发光底物

产品编号 产品名称 规格

BL520A ECL 化学发光底物 100 ml

产品简介： West Pico ECL 超敏发光液用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶 HRP 的抗体 及其关联的抗原。由于采用了*的发光底物系统，West Pico ECL 超敏发光液是目 前zui灵敏的商业化荧光 ECL 检测试剂。

产品组份：

产品编号 产品名称 规格

BL520A-1 ECL 化学发光底物 A 液 50 ml

BL520A-2 ECL 化学发光底物 B 液 50ml

用途：用于 HRP 标记抗体的 Western Blot 和 HRP 标记探针的核酸杂交。

产品特点： 1、具有*灵敏度和高信噪比，可检测 10～100 fg 抗原; 2、可在日光灯下进行发光操作; 3、发光迅速，荧光可使 X 光胶片感光达 12 小时以上，特别适用于痕量蛋白或核 酸检测; 4、可使用更高的抗体稀释倍数(1:2000～1:10000)，极其节省抗体。

使用方法: 1、执行常规 SDS-PAGE、转膜和 Western Blot 步骤。注意用 HRP 标记 lgG 或用 一抗-链亲和素-生物素-HRP 夹法。 2、Western Blot zui后一次洗膜的同时新鲜配制发光工作液：分别取等体积的溶液 A 和 B，放入干净容器中混合。建议立即使用工作液，室温放置数小时后仍可使用但 灵敏度略有降低。 3、用镊子取出膜，搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜*干燥。将膜*浸入发光 工作液(0.125mL 发光工作液/cm2 膜)中，与发光工作液充分接触。室温孵育 3 分钟， 准备立即压片曝光。孵育时间过长不会增加灵敏度，有时还会导致曝光条带异常。发 光过程的本质是酶促反应，使用过少的发光工作液不利反应进行，也会导致膜上条带 曝光不均和明显降低灵敏度。为达节约目的可将膜剪小但勿降低发光液用量。 4、用镊子夹起膜，搭在滤纸上沥干发光工作液。但勿洗去发光液。

5、打开 X 光胶片暗盒，在暗盒内表面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将 Western Blot 膜贴在保鲜膜上，将保鲜膜折起来*包裹 Western Blot 膜，去除气泡和皱褶，可剪 去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖 Western Blot 膜的保鲜膜固定在暗盒内，蛋白带面向上。 6、暗房内压 X 光胶片，分别曝光不同的时间如数秒到数分钟。显影冲洗。 安全性：无特殊毒性，按普通化学品处理。 注意事项： 1、步骤 1～5 可在日光灯下操作;但发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能略 有降低，移到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。 2、长时间曝光或蛋白过量，将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。曝光 不足则条带模糊。 3、发光工作液孵育约 3 分钟后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见， 低丰度蛋白条带发光较弱甚至肉眼不可见但可使 X 光胶片曝光。不能简单以肉眼观察 判断条带发光时间。肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使 X 光胶片感光，因而 弱带可曝光 1-10 小时。如果曝光后条带不佳，可用洗膜缓冲液洗膜，重新孵育二抗， 然后重新用 ECL 发光和曝光。 4、由于超敏发光液极其灵敏，强烈推荐大多数进口抗体起始浓度为一抗 1:1000～ 1:4000，二抗 1:2000～1:5000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带，导致失败。 5、某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光，应选择高质量保鲜膜。 6、使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定 胶片上条带的位置和大小。 7、NaN3 能抑制 HRP 活性，回收第二抗体应避免使用 NaN3，如必需使用勿超过 0.01%。 保存条件： 4 oC 密封避光保存一年以上，短期可放置室温。

ECL化学发光底物 BL520A 现货

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